服务项目 | 服务内容 | 交付结果 | 服务周期 |
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单抗定制 | ELISA筛选鼠单抗 | 抗原制备 | 19-28周 |
鼠多抗血清检测 | |||
融合及亚克隆筛选 | |||
腹水制备抗体 | |||
ELISA抗体对(鼠单抗-单抗) | 抗原制备 | 21-30周 | |
鼠多抗血清检测 | |||
融合及亚克隆筛选,抗体对筛选 | |||
腹水制备抗体 | |||
ELISA抗体对(鼠单抗-兔多抗) | 抗原制备 | 21-30周 | |
鼠多抗血清检测 | |||
兔多抗血清检测 | |||
兔多抗纯化及标记 | |||
融合及亚克隆筛选,抗体对筛选 | |||
腹水制备抗体 |
服务阶段 | 交付产品 |
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动物免疫阶段 | 免疫前血清、免疫血清,15μl/只 |
血清检测报告 | |
融合筛选阶段 | 融合细胞上清,200μl/clone |
融合筛选检测报告 | |
亚克隆阶段 | 稳定细胞上清,1ml/clone; 纯化的抗体,0.1mg/clone |
亚克隆筛选检测报告 | |
交付产品 | 抗体产品,杂交瘤细胞株 |
抗体验证报告 | |
杂交瘤细胞株测序(可选) | 包含抗体轻链序列和重链序列的质粒 |
测序报告 |
ABclonal标准鼠单克隆抗体制备采用最优化的制备流程,所需时间也最短。深受广大科研用户的好评。鼠单抗制备选用五只SPF(Specific Pathogen-Free)级小鼠,采用完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)皮下多点注射。ABclonal保证所有免疫动物都注射同一抗原。
流程 | 时间 | 描述 |
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阴性血清采集 | Day0 | 免疫前血清采集 (20uL/只) |
一免 | Day 1 | 0.1mg免疫原(CFA), 皮下多点注射(10点) |
二免 | Day 14 | 0.1mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
三免 | Day 28 | 0.1mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
四免 | Day 42 | 0.1mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
抗血清采集 | Day 56 | 抗血清发送客户检测 (15uL/只) |
ELISA 检测 | Day 60 | 根据ELISA检测结果,决定是正常牺牲小鼠还是调整免疫周期 |
冲击免疫 | Day 62 | 0.25mg免疫原(盐水), 腹腔 |
融合及亚克隆筛选 | Day 76 | 骨髓瘤细胞和脾细胞融合, 克隆筛选(HAT培养筛选; ELISA, WB, DOT-BLOT, 中和/阻断等 |
细胞定株扩大 | Day 118 | 克隆筛选 |
腹水制备及纯化 | Day 132 | 1mg以上Protein A/G亲和纯化的抗体 |
备注:56天之后,项目周期的具体时间不是确定的,需要根据抗血清ELISA效价检测情况。
鼠单抗制备
保证阳性克隆
个性化
一站式服务
快速和经济节约筛选
高质量高原
ABclonal拥有经验丰富的抗体检测技术人员、完善的抗体检测设备、先进的高通量抗体检测技术,可以为客户定制抗体进行全方位验证。万级细胞房, Mini WB,修饰性抗体检测平台等实现高通量细胞上清内源验证,提高阳性克隆筛选速率,更快更好的拿到符合课题需求的阳性细胞株。
ELISA筛选是单抗筛选中主要的筛选手段,可以从细胞中筛选到有效的阳性克隆,但ELISA实验无法区分假阳性,需要综合其他筛选手段。
细胞融合前,ABclonal会对每只小鼠血清中抗体水平进行检测,选取最佳的小鼠进行融合。
细胞融合后,ABclonal采用MINI-WB筛选系统对阳性细胞株的细胞上清进行批量检测。
利用经典杂交瘤鼠单克隆技术,为客户开发肠道病毒治疗抗体。通过多种实验方案和筛选方案,筛选出多株识别不同人类肠道病毒的特异性单抗,得到有中和活性的高品质鼠单克隆抗体。疫苗和抗体药同时开发,为治疗肠道病毒提供了解决方案。
单抗与四种不同方式制备的肠道病毒抗原反应
筛选出多株识别不同肠道病毒(Human Enterovirus)的特异性单克隆抗;
筛选出两株单抗(上图所示10G2和1F2)具有中和活性,纯化腹水中和效价大于1:2048。其中,10G2和1F2均识别空间表位,且均为肠道病毒中具有重要生物学活性的表位;
筛选出一株单抗可以识别多种肠道病毒通用表位。
诺如病毒,又称诺瓦克病毒(Norwalk Viruses,NV ),是人类杯状病毒科(Human Calicivirus,HuCV)中诺如病毒(Norovirus,NV)属的一种病毒。诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,诺如病毒感染性腹泻属于自限性疾病,没有疫苗和特效药物,因此研究极具挑战。
ABclonal定制开发的诺如蛋白衣壳蛋白(Antigen 1)鼠单抗(mAb)能有效阻止诺如病毒样颗粒与人体受体蛋白HBGA的结合,阻断效果与多克隆抗体(PcAb)相当,且不会与其它基因型(Antigen 2)的病毒颗粒产生交叉反应。 该单抗能识别native状态的蛋白,而不能识别变性后的蛋白,说明抗体的识别表位为构象表位,而不是线性表位。
ELISA测试阻断活性
单抗表位特性检测