服务介绍

  • ABclonal 提供高质量的鼠单抗制备服务,优势主要是高水平抗原设计与抗原制备技术,重组表达的高质量抗原是单抗成功最关键的环节,我们蛋白表达平台有大肠杆菌表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统,我们制备的抗原最大程度上满足天然结构和天然修饰状态,能更高效率和更高成功率的拿到优质的单克隆抗体。另外依赖我们的全通量检测平台实时检测抗体筛选过程当中的应用,满足客户最终实验要求。
  • 单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上,在疾病的诊断、预防和治疗等方面,均显示出巨大的生命力。
制备流程

流程


客户提供

  • 1、目的基因序列、20µL以上质粒模板(浓度100ng/µL,无模板可以基因合成);
  • 2、构建好的表达质粒或者已表达菌液(表达条件和蛋白SDS-PAGE电泳图);
  • 3、多肽路线提供目的基因序列。
服务内容 服务流程 交付结果 服务周期
保证型单克隆抗体定制 抗原分析及设计 抗体设计报告 19-28周
抗原制备 重组蛋白制备 测序报告和SDS-PAGE图
多肽合成及偶联 MS和HPLC报告
动物免疫(鼠) 免疫前阴性血清
效价检测 ELISA结果
融合及亚克隆筛选 根据客户需求给予中间亚克隆的检测结果
细胞定株扩大 提供1-3株杂交瘤细胞株(WB保证型至少2株)
腹水制备及纯化 选择其中一株提供5 mg以上Protein A/G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上
验证 WB/修饰性WB 保证制备抗体能用于内源样本的WB/修饰性WB/IHC/IF/IP/ChIP检测
WB
IHC/IF
IP/ChIP
ELISA抗体对 蛋白抗原 鼠单抗-单抗 提供2株配对杂交瘤细胞株
鼠单抗-兔多抗 提供4对配对抗体(单抗-多抗)
备注
如果没有特殊要求,我们会在抗血清和纯化抗体中加入0.02%硫柳汞;
免疫物种数量:小鼠十只、兔子三只;
ELISA抗体对(鼠单抗-单抗):提供2株配对杂交瘤细胞株,5 mg以上Protein G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上,针对免疫原的ELISA效价在1:50000以上,其中1个抗体生物素标记;
ELISA抗体对(鼠单抗-兔多抗):提供4对配对抗体(单抗-多抗)。单抗: 4株杂交瘤细胞株对应的5 mg以上Protein G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上,提供1-4株杂交瘤细胞株。多抗:2mg以上生物素标记的抗体,浓度为1 mg/mL以上。

服务特色

我们的优势


鼠单抗制备
  • 杂交瘤细胞融合和鼠单抗制备
保证阳性克隆
  • WB阳性克隆
  • 其他应用(根据情况)
个性化
  • 客户(根据筛选结果或自己检测)决定哪一只小鼠进行细胞融合和哪一株细胞进行亚克隆以及放大
一站式服务
  • 提供从免疫原制备到抗体测序一站式服务
快速和经济节约筛选
  • 先进的抗体检测平台
  • 顶尖的抗体检测人员
高质量高原
  • 免费抗原设计
  • 高质量的重组蛋白表达
  • 高质量多肽(HLPC和MS质检)

高通量筛选


ABclonal拥有顶尖的抗体检测技术人员、完善的抗体检测设备、先进的高通量抗体检测技术,可以为客户定制抗体进行全方位验证。
万级细胞房,Mini WB, IHC芯片,多肽芯片,修饰性抗体检测平台等实现高通量细胞上清内源验证,提高阳性克隆筛选速率,更快更好的拿到复合课题需求的阳性细胞株。

Optional screening


解决方案

ABclonal标准鼠单克隆抗体制备采用最优化的制备流程,所需时间也最短。深受广大科研用户的好评。

鼠单抗制备选用五只SPF(Specific Pathogen-Free)级小鼠,采用完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)皮下多点注射。我们保证所有免疫动物都注射同一抗原。

流程 时间 描述
阴性血清采集 Day 0 免疫前血清采集 (20ul/只)
一免 Day 1 0.5mg免疫原(CFA), 皮下多点注射(10点)
二免 Day 14 0.25mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
三免 Day 28 0.25mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
四免 Day 42 0.25mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
抗血清采集 Day 56 抗血清发送客户检测 (20uL/只)
ELISA 检测 Day 60 根据ELISA检测结果,决定是正常牺牲小鼠还是调整免疫周期
冲击免疫 Day 62 0.25mg免疫原(盐水), 腹腔
融合及亚克隆筛选 Day 76 骨髓瘤细胞和脾细胞融合, 克隆筛选
细胞定株扩大 Day 118 克隆筛选
腹水制备及纯化 Day 132 5 mg以上Protein G亲和纯化的抗体,浓度为1 mg/mL以上
内源样本验证 Day 139 保证客户能用于目的实验
备注:56天之后,项目周期的具体时间不是确定的,需要根据抗血清ELISA效价检测情况。
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