服务介绍

实验原理


酶联免疫吸附实验( Enzyme linked immunosorbent assay,简称ELISA )是利用抗体抗原专一性结合进行免疫反应的定性和定量检测。ELISA为免疫学中经典实验,自70年代问世以来,由于其灵敏度高,特异性强,重复性好等优点,发展迅速,目前广泛用于免疫诊断、检测和生物学等诸多领域。

服务优势


  • 严格规范的SOP,确保实验过程无误。
  • 专业的数据分析,计算出浓度接近样本真实情况。
  • 完整的检测报告,包含真实的原始数据、专业结果分析、实验相关器材。
  • 100种免费的ELISA试剂盒,专业的服务,为您降低科研成本!

ABclonal ELISA试剂盒产品特性


  • 标准曲线:线性范围>103,R2值在0.99以上
  • 重复性:板间,板内变异系数均<10%
  • 灵敏度:敏感度高,可达pg/mL
  • 特异性:以50ng/mL平行做特异性试验,不与相近似细胞因子及蛋白反应
  • 回收率:要求回收率达到80-120%
  • 线性稀释:要求线性范围在80-120%

服务承诺


  • 本公司会在最短的时间内快速将实验完成。
  • 本公司会根据不同的样本,进行差异化方案的实验操作。
  • 本公司会提供实验报告:包括详细的实验方法以及ELISA结果的相关测数据和标准曲线图表。
  • 本公司保证检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果。

客户提供


  • 客户须在实验开始前提供详细的样品资料(如组织来源等),尽可能详细的背景资料,包括样本的种属、特性、参考文献等,以便于实验的顺利进行。
  • 客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
  • 客户提供的培养上清、人和动物的血清、血浆、组织匀浆及其他体液,样本需要-20℃或-80℃保存,必须保证样本的质量以及准确性,ELISA试剂盒,标明来源和说明书,也可让我司代买。
  • ELISA所需要的ELISA实验试剂盒,可自行提供,或在本公司购买相应指标。

技术路线

案例分析

案例

常见问题

样品制备方法


  • 细胞培养上清:

    1000 g离心10分钟,及时检测,或分装冻存-20℃—-70℃ 冰箱(24小时内检测可放入2-8℃储存),避免反复冻融。

  • 血清样本:

    使用一次性无热源无内毒素试管,分离血清前,室温凝聚30分钟,1000 g离心10分钟,及时检测,或分装冻存-20℃—-70℃ 冰箱(24小时内检测可放入2-8℃储存),避免反复冻融。

  • 血浆样本:

    血凝抗凝剂推荐使用EDTA,在血样收集 30分钟内1000g离心15分钟收集样本。及时检测,或分装冻存-20℃—-70℃冰箱 (24小时内检测可放入2-8℃储存),避免反复冻融

    注意:血清血浆样本避免使用溶血、高血脂样本,以免影响检测结果。

  • 样本稀释:

    如果样本中的检测浓度高于标准品的最高值,请将样品做适当倍数稀释后检测,建议正式实验前做预实验以确定稀释倍数。

常见问题


问题 可能原因 解决方法
阴性对照出现了阳性结果 试剂或者耗材污染 更换试剂,使用一次性耗材
底物污染 加底物前检查底物是否为透明无色,勿用变蓝的底物,重新用新的底物试验
洗板出现问题 更换更强配方的洗涤液,增加洗板次数,延长洗板时间
如果是在双抗体夹心法中出现,有肯能是包被抗体与二抗间有交叉反应 更换包被抗体或二抗
阴性对照孔被阳性对照污染 注意洗涤时不要把洗液溢出孔外,不使阴阳对照孔液体涟接一起
不同批试剂混用 检查试剂批号,勿用不同批号试剂
酶结合物过量 检查酶稀释度,按说明书标识的稀释度稀释
使用了过多的抗体 减少抗体使用量
整板出现高背景 二抗产生了非特异性吸附 减少二抗使用量,缩短二抗反应时间
显色液不新鲜 使用现配的显色液
显色反应时间过长没有终止 控制显色反应时间,及时终止反应
试剂或者耗材污染 更换试剂,使用一次性耗材
反应温度过高导致的非特异性吸附 严格控制反应在最适温度下进行
封闭条件不佳导致的非特异性吸附 更换封闭能力更强的封闭液,延长封闭时间
显色信号弱 包被条件不合适 提高包板浓度,延长包板时间
抗原抗体反应不够充分 延长反应时间,确保反应在最适温度下进行
试剂过期 检查试剂盒有效期,不使用过期试剂
试剂污染 检查试剂是否污染
酶标仪滤光片不匹配 检查酶标仪设置及滤光片
试剂盒平衡不充分 确保试剂盒试验前平衡至室温
显色时间不够 增加底物显色时间
显色液配方不恰当 增加显色底物的量
二抗结合不够 提高二抗浓度,延长反应时间,更换效果更好的二抗
梯度稀释做ELISA时产生跳孔现象 酶标版叠放导致传热不均匀,各孔反应温度有差异 尽量避免酶标版叠放在一起
移液器稀释时未能保持连续性 定期校准移液器,确保移液器的正确使用
反应溶液蒸发 酶标版用封条密封或者加盖
洗板不均匀 确定洗板机能够正常工作
酶标版底有杂物或者水珠 读板时清理干净酶标版底部
无显色信号 检测抗体、酶、或显色剂漏加 检查试验操作流程,重复试验
酶被叠氮钠污染 使用新配配制的试剂
试剂添加顺序有误 检查复核试验添加顺序、流程,重复试验
标曲佳但样品孔无信号 样品含量低或样品中无检测物 设置阳性对照,重复实验
样品基质遮盖检测 重新稀释样品再测
标曲佳但样品信号偏高 样品中待检物超过标准曲线范围 重新稀释样品再测
边缘效应 孵育温度不均衡 孵育时每步均使用封板胶纸,避免在环境温度变化大的地方孵育,勿叠放反应板
报价表
  1. 您可以通过电子邮件、电话或在线与我们联系。
  2. 对于批量订单,请发送至邮箱cn.market@abclonal.com,欢迎电话垂询400-999-6126。