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Acetyl-p53-K382 Rabbit pAb (A18663)

Dot-blot analysis of all sorts of peptides using Acetyl-p53-K382 antibody (A18663) at 1:1000 dilution.

All(1)|
货号: A18663
促销价:   ¥1180
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详细信息

推荐稀释比
  • DB1:500 - 1:1000
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反应物种
Human
同种型
IgG
理论分子量
44kDa
实际分子量
Refer to figures
产品形式
Liquid
存储缓冲液
Store at -20℃. Avoid freeze / thaw cycles.
Buffer: PBS with 0.01% thimerosal,50% glycerol,pH7.3.
细胞定位
Cytoplasm,Endoplasmic reticulum,Mitochondrion matrix,Nucleus,PML body
纯化方式
Affinity purification

抗原信息

免疫原
A synthetic acetylated peptide around K382 of human p53 (NP_000537.3).

背景信息

This gene encodes a tumor suppressor protein containing transcriptional activation, DNA binding, and oligomerization domains. The encoded protein responds to diverse cellular stresses to regulate expression of target genes, thereby inducing cell cycle arrest, apoptosis, senescence, DNA repair, or changes in metabolism. Mutations in this gene are associated with a variety of human cancers, including hereditary cancers such as Li-Fraumeni syndrome. Alternative splicing of this gene and the use of alternate promoters result in multiple transcript variants and isoforms. Additional isoforms have also been shown to result from the use of alternate translation initiation codons from identical transcript variants (PMIDs: 12032546, 20937277).

基因ID
Swiss Prot
别名
P53; BCC7; LFS1; BMFS5; TRP53; Acetyl-p53-K382

关联靶点

TP53为关键词搜索文献记录,得到上述基因与TP53的研究紧密相关,排序顺序根据研究相关程度由高到低决定。(所显示数字代表两者共同出现的已发表文献数量)
1/

关联领域

TP53为关键词搜索文献记录,得到上述相关热词信息,可反映出TP53的研究趋势与热点。(关联领域与基因名称的距离代表其研究热度)

* 该数据来源于赛特新思(citexs.com)
来自于发表文献,仅供参考所用,ABclonal不承担任何责任。

暂无以TP53为关键词搜索的文献记录。

该服务由赛特新思提供,上述关联分析来自已发表文献,仅供参考所用,ABclonal不承担任何责任。

ABclonal公司的抗体,可以回收利用几次?

首先,一般抗体不推荐客户回收利用,抗体使用之后缓冲体系已经发生改变,不同客户在回收抗体的保存条件上也会有差异,所以抗体回收使用效果无法保证。另外,ABclonal公司也做过一批抗体回收验证测试,测试结果显示不同抗体可回收次数不同,一般效价越高的抗体,可重复使用的次数越多,客户可根据实验情况来确定。
注:我们将孵育完毕后剩余的抗体回收到离心管中置于4℃保存,效价高的抗体可至少保存1周,至少重复利用3次。

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ABclonal作为国产抗体品牌的优势?

武汉爱博泰克生物(ABclonal)科技有限公司是国产品牌,她成立于2011年,公司依托ABclonal美国波士顿抗体与蛋白研发中心、中国光谷生物城(武汉)抗体生产基地以及上海张江分子酶研发中心,凝聚了十余位来自哈佛大学、麻省理工、复旦大学、上海交大、中科院生化细胞所和武汉大学的全球知名分子和免疫学方面博士,组成我们的科学家团队,通过聚焦抗体与酶核心技术,致力于打破国际技术的垄断,将公司打造成为科研工具和诊断原料的国内领导品牌,乃至弯道超越国际巨头。 我们拥有包括兔多克隆抗体、小鼠单克隆抗体、兔单克隆抗体的生产研发平台,同时也有包括WB,IHC,IF,IP,CHIP在内的检测平台,我们对每一支自产的抗体进行了严格的检测。当然,我们部分直销地区也可以帮客户代购进口品牌的产品。同时也有抗体定制服务。ABclonal抗体优势:1,严自检,保质量;2产品多,指标全;3,价格低,货期短。注:ABclonal抗体价格体系详情见附件

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ABclonal抗体成分?

ABclonal抗体成分在平时工作当中,常会有客户咨询我们的抗体用的什么buffer进行保存,一般来说,我们的buffer的成分是:PBS含0.03%的proclin300、0.05%牛血清白蛋白、50%甘油;也有一些是PBS含0.03%的proclin300,50%甘油。防腐剂 Proclin 300活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)。ProClin生物灭活剂能够迅速穿透细胞膜,抑制对细胞呼吸至关重要的特定酶,因此一接触微生物有机体就会立即抑制细胞活性。ProClin的多个特定毒性位点可以防止微生物产生高水平的耐药性。

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实验方案

折叠内容
DB

Dot Blot检测标准操作流程

一、实验仪器试剂和耗材

  • (1)Blocking Buffer(RK05742)
  • (2)Antibody Dilution Buffer(RK05743)
  • (3)TBST Buffer(RM00013)
  • (4)HRP 偶联二抗(AS014,AS003)
  • (5)SignalFire™ ECL Reagent(RM00020/RM00021)
  • (6)Nitrocellulose membrane (0.45μm)(RM00017)
  • (7)Nitrocellulose membrane (0.2μm)(RM02801)

二、实验步骤

1、膜的准备

Dot Blot检测采用NC膜,取NC膜裁成6.5cm宽长条,并在其上画长宽为1cm×1cm正方形小格(在膜上面的蓝色纸上画,画格时膜(白色)与蓝色纸必须完全重叠,让蓝色纸上的正方形小格能在膜上留下正确的划痕)。
多肽使用0.45μM的NC膜,DNA/RNA Oligo 使用0.2μm的NC膜。

2、多肽稀释或DNA/RNA Oligo稀释

将不同浓度的多肽用PBS稀释为成50ng/ul(稀释为需要的浓度即可)。或者将不同浓度的DNA/RNA Oligo 用无酶水稀释至10μM(稀释为需要的浓度即可)。

3、多肽或DNA/RNA Oligo包被

揭开膜上面的蓝色保护纸,用移液器吸取50ng/μL多肽稀释液2ul点在膜上1cm×1cm正方形小格中心,即多肽包被量为100ng(包被量根据需求调整)。点样完成后,将NC膜放入37℃烘箱中30min。
如样本为DNA/RNA Oligo,则用移液器吸取10μM DNA/RNA Oligo稀释液2ul点在膜上1cm×1cm正方形小格中心,即每小格DNA/RNA Oligo包被量为100μM(包被量根据需求调整)。点样完成后,将NC膜放入37℃烘箱中30min,再用紫外交联20min。

4、封闭

把膜放入相应的大小的抗体孵育容器中,加入适量Blocking Buffer室温封闭1h。

5、一抗孵育

封闭结束10min前,用Antibody Dilution Buffer稀释一抗备用。封闭结束后去除封闭液,加入稀释好的一抗工作液,室温2h或4℃过夜。

6、洗涤

去除一抗工作液,加入适量TBST Buffer洗杂4次,5min/次。

7、二抗孵育

洗杂结束前10min,用Antibody Dilution Buffer稀释二抗备用。去除TBST Buffer,加入稀释好的二抗工作液,室温1h。

8、洗涤

去除二抗工作液,加入适量TBST Buffer洗杂4次,5min/次。

9、曝光
  • a. 根据膜的大小,按1cm*1cm的膜使用 20ul工作液,按比例吸取等体积的 SolutionⅠ和SolutionⅡ混匀,配制成发光检测工作液。
  • b. 用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余的液体。用移液器将工作液加到转印膜上,使其均有覆盖,室温孵育 1-2min,此步骤可在洁净保鲜膜上或塑料盒中完成。
  • c. 压片检测:将膜固定于片夹内。暗室内压片30s,立即显影定影,根据结果再调整压片时间。或直接分别压片 10s、30s、60s、90s,然后一起显影定影观察结果。
  • d. 荧光成像仪检测:将膜放置到荧光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。
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