流式抗体专题
FLOW CYTOMETRY FCM

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是利用流式细胞仪对特定波长激光照射下的快速直线流动状态中的细胞或颗粒同时进行多参数快速定性定量分析和分选的技术。该技术发端于20世纪60年代,目前已广泛应用于生命科学基础研究、临床诊断和药物开发。

ABclonal流式解决方案

ABclonal根据市场需求,基于革命性的第四代重组兔单抗技术,研发出高特异性和高灵敏度及批间差异小的流式抗体,可实现高重复性、高可靠性且低背景的细胞分析或细胞分选,ABclonal提供即用型荧光素偶联标记抗体,同时也提供未标记抗体以便您自行定制实验。

流式抗体优势

SMab®平台

拥有独立知识产权的基于新一代单B细胞筛选和培养的单克隆抗体开发平台,以ISO9001和ISO13485质量管理体系标准严格生产,批间一致性更高。

特异性好

抗体在筛选以及偶联成功后均经过阳性样本和阴性样本全面验证, 信号跃迁明显,无杂峰。

滴度测定

每一支直标抗体均经过滴度测试,推荐最佳的抗体用量,减少客户检测条件摸索。

流式抗体分类

反应物种
Human
Mouse
Rat
荧光素
其他荧光标记
细胞类型
T细胞
B细胞
NK细胞

流式研究工具
ABCLONAL

01细胞计数:将培养好的细胞收集于50mL离心管中并计数;500 g离心4min,去上清;

02制备单细胞悬液:将收集的细胞用 1mL 0.5% BSA/PBS溶液重悬,400 g离心3 min,去上清,重复2次;用0.5% BSA/PBS溶液重悬细胞,分配到96孔板中,每孔50 μL细胞悬液;

03一抗孵育:每孔加入一抗稀释液50μL。振荡,室温反应20 min;

04洗涤:400g离心5min,去上清;

05二抗孵育:如非荧光染料直标抗体加入100 μL 荧光二抗 ,重悬避光振荡,室温反应20 min;直标荧光抗体直接跳转到步骤8;

06以400g的速度离心5分钟,去上清;

07洗涤:加入200μL0.5% BSA/PBS重悬,400g离心5 min,去上清,重复两遍;

08用200 μL 0.5%BSA/PBS重悬细胞,上机分析。

01将培养好的细胞收集于50 mL离心管中并计数;500 g离心4 min,去上清;

02将收集的细胞用1mL 0.5% BSA/PBS溶液重悬,400 g离心3 min,弃上清,用 0.5% BSA/PBS溶液重悬细胞,按设计方案对应96孔板中每孔加100 μL细胞悬液,离心,去上清;

03Live/Dead (Zombie NIR)染色,L/D staining solution 用1×PBS按1:1500的比例稀释,按设计将L/Dstaining solution分配到96孔V型板里,每孔100 μL,重悬每孔中的细胞,混合,避光室温孵育15 min;

04400g离心5min,弃上清,用FACS buffer洗2次,按设计将1X Intracellular Fixation buffer分配到96孔V型板里,每孔100μL,重悬每孔中的细胞,混合 ,避光室温孵育30min;

05400g离心5min,弃上清,用1X Permeablization buffer洗2次,按设计将用1X Perm buffer稀释好的一抗分配到96孔V型板里,每孔100μL,重悬每孔中的细胞,混合,避光室温孵育30 min;

06400g离心5min,去上清,用1X Permeablization buffer洗2次;

07按设计将用1X Permeablization buffer 稀释好的荧光二抗分配到96孔V型板里,每孔100μL,重悬每孔中的细胞,混合,避光室温孵育30 min;直标荧光抗体直接跳转到步骤9;;

08400g离心5min,去上清,用1X Permeablization buffer洗2次;

09用200μL FACS buffer重悬细胞,上机分析。