常见流式panel

免疫细胞分型Panel 物种 标志物
T/B/NK分析 Human CD45
Human CD3E
Human CD4
Human CD8a
Human CD19
Human CD16
Human CD56
Th1/Th2/Th17细胞 Human CD3E
Human CD4
Human IL-17A
Human IFN-γ
Human IL-4
T细胞活化状态分析 Human CD3E
Human CD4
Human CD8a
Human CD25
Human CD69
Naive/Memory T细胞 Human CD3E
Human CD4
免疫细胞分型Panel 物种 标志物
Naive/Memory T细胞 Human CD45RA
Human CD197 (CCR7)
B细胞常见亚群分析 Human CD45
Human CD19
Human CD20
Human CD27
Human CD38
Human IgD
Human IgM
M1巨噬细胞 Human CD3E
Human CD20
Human NCAM1/CD56
Human CD86
Human HLA-DR
M2巨噬细胞 Human CD3E
Human CD20
Human NCAM1/CD56
Human CD163
Human MMR/CD206
Panel名称 物种 标志物
T淋巴细胞亚群 Mouse CD3e
Mouse CD4
Mouse CD8a
Th1/Th2/Th17细胞 Mouse CD3e
Mouse CD4
Mouse IFN-γ
Mouse IL-4
Mouse IL-17A
Naive/Memory T细胞 Mouse CD3e
Mouse CD4
Mouse CD44
Panel名称 物种 标志物
Naive/Memory T细胞 Mouse CD62L
T淋巴细胞活化 Mouse CD3e
Mouse CD4
Mouse CD8
Mouse CD25
Mouse CD69
巨噬细胞 Mouse CD45
Mouse CD11b
Mouse F4/80
Mouse CD86
Mouse CD206
检测案例

常见免疫细胞分型(T, B, NK细胞)

Panel设计

荧光染料 7-AAD-FMO PE-FMO ABflo® 647-FMO ABflo® 700-FMO ABflo® 488-FMO 全染组 检测物种 产品货号 样本
ABflo® 488 CD45-ABflo® 488 CD45-ABflo® 488 CD45-ABflo® 488 CD45-ABflo® 488 - CD45-ABflo® 488 Human A22494 人PBMC
ABflo® 647 CD19-ABflo® 647 CD19-ABflo® 647 - CD19-ABflo® 647 CD19-ABflo® 647 CD19-ABflo® 647 Human A23009
ABflo® 700 CD3-ABflo® 700 CD3-ABflo® 700 CD3-ABflo® 700 - CD3-ABflo® 700 CD3-ABflo® 700 Human A24943
PE CD56-PE - CD56-PE CD56-PE CD56-PE CD56-PE Human A22826
7-AAD - 7-AAD 7-AAD 7-AAD 7-AAD 7-AAD Human -

多色人工圈门分析

结果分析:7-AAD-FMO、CD56-PE-FMO、CD19-ABflo®647-FMO、CD3-ABflo®700-FMO、CD45-ABflo®488-FMO对照组,阴、阳性分群清晰,可准确区分阳性、阴性细胞群,实验组合中其他荧光染料对于检测目标荧光染料的通道中所观测信号的影响不大。

结果分析:CD45、CD19、CD3、CD56、7-AAD多色实验,CD3+ T细胞、CD3- CD19+ B细胞、CD3- CD19- CD56+ NK细胞分群清晰。

各标志物信号值分布自动降维tSNE分析

结果分析:此图中颜色从红到蓝代表相应标志物表达强弱,CD3、CD19、CD56信号值分布图与对应T细胞、B细胞、NK细胞分群一致。

人工圈门和自动tSNE比对分析

结果分析:该图红色为从Lymphocytes圈出的Live细胞群,蓝色为从Live细胞群中圈出的CD19+B细胞(CD45+CD3-CD19+),橙色为从Live细胞群中圈出的NK细胞(CD45+CD3- CD56+),绿色为从Live细胞群中圈出的CD3+ CD56- T细胞(CD3+ CD56+),深绿色为从Live细胞群中圈出的CD3+ CD56+ NKT细胞,人工圈门和FlowSOM自动分析分群及细胞量基本一致。

FlowSOM聚类分析

结果分析:此图为聚类FlowSOM最小生成树,背景相同的为一群细胞,图上泡泡大小表明群体大小,扇形图表明相应颜色标志物表达,扇形面积大标志物表达越强,反之越弱。

结果分析:此图为FlowSOM Heatmap热图,图中颜色从红到蓝代表相应标志物表达强弱,Pop0 CD3+ CD56- T cell亚群(CD45+ CD3+ CD19- CD56-),Pop1为CD3+ CD56+ NKT cell 亚群(CD45+ CD3+ CD19- CD56+),Pop3为NK cell亚群(CD45+ CD3- CD19- CD56+),Pop6为CD19+ B cell亚群(CD45+ CD3- CD19+ CD56-)。

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