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ABflo® 647 Rabbit anti-Human EGFR mAb (A24266)

Flow cytometry: 1X10^6 Jurkat cells (negative control,left) and A-431 cells (right) were surface-stained with ABflo® 647 Rabbit anti-Human EGFR mAb(A24266,5 μl/Test,orange line) or ABflo® 647 Rabbit IgG isotype control (A22070,5 μl/Test,blue line).Non-fluorescently stained cells were used as blank control (red line).

Flow cytometry:1X10^6 A-431 cells were surface-stained with ABflo® 647 Rabbit IgG isotype control (A22070,5 μl/Test,left) or ABflo® 647 Rabbit anti-Human EGFR mAb(A24266,5 μl/Test,right).

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货号: A24266
促销价:   ¥1500
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折叠内容
CustomerJan 222024
评分
Experiment Type
FC
Sample
Kidney cancer tissue
Description
Flow Cytometry analysis of human kidney cancer tissue, using ABflo®647 Rabbit anti-Human EGFR monoclonal antibody at a dilution of 1:100, the positive signal transition is obvious.

详细信息

推荐稀释比
  • FC5 μl per 10^6 cells in 100 μl volume
浓度查询

请输入产品标签上的lot号,例如4000000001

反应物种
Human
同种型
IgG
克隆号
ARC61443-ABflo647
产品形式
Liquid
偶联物
ABflo® 647. Ex:648nm. Em:664nm.
存储缓冲液
Store at 2-8℃. Avoid freeze.
Buffer: PBS with 0.03% proclin300,0.2% BSA,pH7.3.
细胞定位
Cell membrane,Endoplasmic reticulum membrane,Endosome,Endosome membrane,Golgi apparatus membrane,Nucleus membrane,Nucleus,Secreted,Single-pass type I membrane protein
纯化方式
Affinity purification

抗原信息

免疫原
Recombinant fusion protein containing a sequence corresponding to amino acids 335-525 of human EGFR(NP_005219.2).
序列
KVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPVAFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAVVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVS

用户验证的应用

应用及物种

    背景信息

    The protein encoded by this gene is a transmembrane glycoprotein that is a member of the protein kinase superfamily. This protein is a receptor for members of the epidermal growth factor family. EGFR is a cell surface protein that binds to epidermal growth factor. Binding of the protein to a ligand induces receptor dimerization and tyrosine autophosphorylation and leads to cell proliferation. Mutations in this gene are associated with lung cancer.

    关联靶点

    EGFR为关键词搜索文献记录,得到上述基因与EGFR的研究紧密相关,排序顺序根据研究相关程度由高到低决定。(所显示数字代表两者共同出现的已发表文献数量)
    1/

    关联领域

    EGFR为关键词搜索文献记录,得到上述相关热词信息,可反映出EGFR的研究趋势与热点。(关联领域与基因名称的距离代表其研究热度)

    * 该数据来源于赛特新思(citexs.com)
    来自于发表文献,仅供参考所用,ABclonal不承担任何责任。

    暂无以EGFR为关键词搜索的文献记录。

    该服务由赛特新思提供,上述关联分析来自已发表文献,仅供参考所用,ABclonal不承担任何责任。

    ABclonal公司的抗体,可以回收利用几次?

    首先,一般抗体不推荐客户回收利用,抗体使用之后缓冲体系已经发生改变,不同客户在回收抗体的保存条件上也会有差异,所以抗体回收使用效果无法保证。另外,ABclonal公司也做过一批抗体回收验证测试,测试结果显示不同抗体可回收次数不同,一般效价越高的抗体,可重复使用的次数越多,客户可根据实验情况来确定。
    注:我们将孵育完毕后剩余的抗体回收到离心管中置于4℃保存,效价高的抗体可至少保存1周,至少重复利用3次。

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    ABclonal作为国产抗体品牌的优势?

    武汉爱博泰克生物(ABclonal)科技有限公司是国产品牌,她成立于2011年,公司依托ABclonal美国波士顿抗体与蛋白研发中心、中国光谷生物城(武汉)抗体生产基地以及上海张江分子酶研发中心,凝聚了十余位来自哈佛大学、麻省理工、复旦大学、上海交大、中科院生化细胞所和武汉大学的全球知名分子和免疫学方面博士,组成我们的科学家团队,通过聚焦抗体与酶核心技术,致力于打破国际技术的垄断,将公司打造成为科研工具和诊断原料的国内领导品牌,乃至弯道超越国际巨头。 我们拥有包括兔多克隆抗体、小鼠单克隆抗体、兔单克隆抗体的生产研发平台,同时也有包括WB,IHC,IF,IP,CHIP在内的检测平台,我们对每一支自产的抗体进行了严格的检测。当然,我们部分直销地区也可以帮客户代购进口品牌的产品。同时也有抗体定制服务。ABclonal抗体优势:1,严自检,保质量;2产品多,指标全;3,价格低,货期短。注:ABclonal抗体价格体系详情见附件

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    ABclonal抗体成分?

    ABclonal抗体成分在平时工作当中,常会有客户咨询我们的抗体用的什么buffer进行保存,一般来说,我们的buffer的成分是:PBS含0.03%的proclin300、0.05%牛血清白蛋白、50%甘油;也有一些是PBS含0.03%的proclin300,50%甘油。防腐剂 Proclin 300活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)。ProClin生物灭活剂能够迅速穿透细胞膜,抑制对细胞呼吸至关重要的特定酶,因此一接触微生物有机体就会立即抑制细胞活性。ProClin的多个特定毒性位点可以防止微生物产生高水平的耐药性。

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    实验方案

    折叠内容
    FC

    FC 流式标准操作流程

    细胞表面染色操作流程
    • 1. 细胞计数:将培养好的细胞收集于50 mL离心管中并计数;500 g离心4 min,去上清;
    • 2. 制备单细胞悬液:将收集的细胞用 1mL 0.5% BSA/PBS溶液重悬,400 g离心3 min,去上清,重复2次;用 0.5% BSA/PBS溶液重悬细胞,分配到96孔板中,每孔50 μL细胞悬液;
    • 3. 一抗孵育:每孔加入一抗稀释液50 μL。振荡,室温反应20 min;
    • 4. 洗涤:400 g离心5 min,去上清;
    • 5. 二抗孵育:如非荧光染料直标抗体加入100 μL 荧光二抗 ,重悬避光振荡,室温反应20 min;直标荧光抗体直接跳转到步骤8;
    • 6. 以 400 g 的速度离心 5 分钟,去上清;
    • 7. 洗涤:加入200 μL 0.5% BSA/PBS重悬,400 g离心5 min,去上清,重复两遍;
    • 8. 用200 μL 0.5% BSA/PBS重悬细胞,上机分析。
    细胞胞内染色操作流程
    • 1. 将培养好的细胞收集于50 mL离心管中并计数;500 g离心4 min,去上清;
    • 2. 将收集的细胞用1mL 0.5% BSA/PBS溶液重悬,400 g离心3 min,弃上清,用 0.5% BSA/PBS溶液重悬细胞,按设计方案对应96孔板中每孔加100 μL细胞悬液,离心,去上清;
    • 3. Live/Dead (Zombie NIR)染色,L/D staining solution 用1×PBS按1:1500的比例稀释,按设计将L/D staining solution分配到96孔V型板里,每孔100 μL,重悬每孔中的细胞,混合,避光室温孵育15 min;
    • 4. 400 g离心5 min,弃上清,用FACS buffer洗2次,按设计将1X Intracellular Fixation buffer分配到96孔V型板里,每孔100μL,重悬每孔中的细胞,混合 ,避光室温孵育30min;
    • 5. 400 g离心5 min,弃上清,用1X Permeablization buffer洗2次,按设计将用1X Perm buffer稀释好的一抗分配到96孔V型板里,每孔100μL,重悬每孔中的细胞,混合,避光室温孵育30 min;
    • 6. 400 g离心5 min,去上清,用1X Permeablization buffer洗2次;
    • 7. 按设计将用1X Permeablization buffer 稀释好的荧光二抗分配到96孔V型板里,每孔100μL,重悬每孔中的细胞,混合,避光室温孵育30 min;直标荧光抗体直接跳转到步骤9;
    • 8. 400 g离心5 min,去上清,用1X Permeablization buffer洗2次;
    • 9. 用200μL FACS buffer重悬细胞,上机分析。
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