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内源蛋白的产生和降解一般都维持在一个平衡状态,因此在稳定的环境因素下细胞内的蛋白含量是也是稳定的。但是在体外研究中,蛋白合成过程终止,而降解大大增强,从而影响蛋白得率。因此我们建议使用多种小分子组成的抑制剂混合物来抑制蛋白酶的功能,阻止蛋白降解情况的发生。通常来讲,蛋白酶抑制剂Cocktail应用于哺乳动物裂解液或组织提取液,用以增加蛋白稳定性。如果没有Cocktail保护,样品中存在的蛋白酶将会降解包括磷酸化蛋白在内的全部蛋白。ABclonal蛋白酶抑制剂Cocktail是含有6种广谱蛋白酶抑制剂的混合物,能有效保护蛋白完整性。
组分 | 浓度 | 靶点 | 类型 |
AEBSF | 104 mM | Serine proteases | Irreversible |
Aprotinin | 80 μM | Serine proteases | Reversible |
Bestatin | 5 mM | Aminopeptidases | Reversible |
E-64 | 1.5 mM | Cysteine proteases | Irreversible |
Leupeptin | 2 mM | Serine and cysteine proteases | Reversible |
Pepstatin A | 1.5 mM | Aspartic proteases | Reversible |
-20°C保存,2年有效。使用时请室温放置,用完立即放回-20°C。
1、本产品适用于Western Blot, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay等实验。
2、在室温下溶解DMSO储液,然后在您的实验体系中,按照1:100的比率(体积比体积)将抑制剂cocktail加入到样品溶液中(比如细胞裂解液或者组织抽提物)。按照建议的用量,一管产品可以抑制20g湿重的细胞得到的提取物中的蛋白酶。
1.DMSO在低温下融化较慢,建议在25°C下融化。
2.某些 DUB 蛋白酶 (例如 ATAXIN-3)无法被常见的蛋白酶抑制剂抑制,例如E-64,AEBSF,bestatin,leupeptin和Aprotinin。