服务流程

服务内容及说明

服务项目 服务内容 分布流程 服务周期
多抗定制 普通蛋白路线 蛋白抗原制备 4-6周
动物免疫 8周
抗体纯化及检测 2周
蛋白表达及纯化 咨询 14周
磷酸化、乙酰化修饰、甲基化修饰 多肽抗原制备 2-3周
动物免疫 10周
抗体纯化及检测 3周
免疫外包(2只兔子/5只小鼠/3只大鼠/3只豚鼠) 咨询 8周
兔多抗持续采血(持续得到同批次优质抗体) 咨询 17周
客户提供
  1. 完整的项目信息表,包括目的基因的物种、序列等信息。
  2. 免疫外包项目需客户提供蛋白抗原:重组蛋白4mg以上,蛋白纯度大于85%,蛋白分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在1-5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供4 mg以上重组蛋白。
  3. 免疫外包项目需客户提供多肽抗原:裸肽5mg以上,多肽纯度大于85%,不少于10个aa,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白。若要求抗原亲和纯化,需额外提供 8 mg以上裸肽。
  4. 其他类型抗原请具体咨询,另外也可选择由ABclonal制备抗原。
交付标准
  1. 免疫前阴性血清(兔子阴性血清100μL,鼠类阴性血清15μL)、0.1mg-1 mg纯化的免疫原、2 mg以上抗原亲和纯化后的多克隆抗体,并保证制备抗体Western Blot 1:1000检测到10 ng抗原,保证DB是1:1000检测到100 ng抗原。
  2. 免疫外包,免疫前阴性血清(兔子阴性血清100μL,鼠类阴性血清15μL)、抗血清(兔子20-40 mL、大鼠3-5mL;豚鼠3-5mL;小鼠 0.2mL)。
  3. 结题报告:包括免疫原序列、SDS-PAGE电泳图谱、表达克隆测序报告、效价检测ELISA结果,WB检测免疫原结果等。

解决方案

ABclonal标准多克隆抗体制备采用优化的制备流程,所需时间较短。深受广大科研用户的好评。多抗制备选用两只SPF(Specific Pathogen-Free)级日本大耳白,采用完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)皮下多点注射。ABclonal保证所有免疫动物都注射同一抗原。

流程 时间 描述
阴性血清采集 Day0 免疫前血清采集 (5mL/只)
一免 Day 1 0.3mg免疫原(CFA), 皮下多点注射(10点)
二免 Day 14 0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
三免 Day 35 0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
四免 Day 56 0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
抗血清采集 Day 63 100μL/只
ELISA 检测 Day 64 根据ELISA检测结果,决定是正常牺牲兔子还是调整免疫周期
最终采血/加免 Day 70 牺牲兔子或加免,0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点)
纯化/检测 2-3周 2mg以上抗原纯化抗体

*备注:客户提供抗原,项目周期大概10周左右,ABclonal制备重组蛋白抗原/多肽抗原,周期大概为14周/15周左右。

ABclonal免疫外包服务免疫2只兔子/3只大鼠/3只豚鼠/5只小鼠,服务内容仅限于动物免疫及抗血清采集,周期大概9周左右。客户如有额外需求,另行约定。

案例展示

水稻“增产减肥”,开启农业新一轮“绿色革命”

  • ABclonal合作技术:
    SLR1蛋白表达及抗体定制
  • 题目:
    Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture
  • 物种:

    Oryza sativa

    应用:
    WB
    PMD:
    30111841

  • 客户单位:
    中国科学院遗传与发育生物学院研究所

造血干祖细胞归巢世界难题谜底揭开

  • ABclonal合作技术:
    VCAM-1蛋白表达及抗体定制
  • 题目:
    VCAM-1+ macrophages guide the homing of HSPCs to a vascular niche
  • 物种:
    Zebrafish
    应用:
    IF
    PMD:
    30455424

  • 客户单位:
    中国科学院上海营养与健康研究院

中国学者关于DNA甲基转移酶的最新发现有望改写教科书

  • ABclonal合作技术:
    DNMT1蛋白表达及抗体定制
  • 题目:
    Stella safeguards the oocyte methylome by preventing de novo methylation mediated by DNMT1
  • 物种:

    Mus musculus

    应用:
    WB IF
    PMD:
    30487604

  • 客户单位:
    中科院生物物理所

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