服务流程
售前沟通
接收订单及样品
基因合成/载体构建
蛋白表达/多肽合成
动物免疫
抗血清检测
抗体纯化
抗体验证
产品交付
服务内容及说明
| 服务项目 |
服务内容 |
分布流程 |
服务周期 |
| 多抗定制 |
普通蛋白路线 |
蛋白抗原制备 |
4-6周 |
| 动物免疫 |
8周 |
| 抗体纯化及检测 |
2周 |
| 蛋白表达及纯化 |
咨询 |
14周 |
| 磷酸化、乙酰化修饰、甲基化修饰 |
多肽抗原制备 |
2-3周 |
| 动物免疫 |
10周 |
| 抗体纯化及检测 |
3周 |
| 免疫外包(2只兔子/5只小鼠/3只大鼠/3只豚鼠) |
咨询 |
8周 |
| 兔多抗持续采血(持续得到同批次优质抗体) |
咨询 |
17周 |
客户提供
- 完整的项目信息表,包括目的基因的物种、序列等信息。
- 免疫外包项目需客户提供蛋白抗原:重组蛋白4mg以上,蛋白纯度大于85%,蛋白分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在1-5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供4 mg以上重组蛋白。
- 免疫外包项目需客户提供多肽抗原:裸肽5mg以上,多肽纯度大于85%,不少于10个aa,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白。若要求抗原亲和纯化,需额外提供 8 mg以上裸肽。
- 其他类型抗原请具体咨询,另外也可选择由ABclonal制备抗原。
交付标准
- 免疫前阴性血清(兔子阴性血清100μL,鼠类阴性血清15μL)、0.1mg-1 mg纯化的免疫原、2 mg以上抗原亲和纯化后的多克隆抗体,并保证制备抗体Western Blot 1:1000检测到10 ng抗原,保证DB是1:1000检测到100 ng抗原。
- 免疫外包,免疫前阴性血清(兔子阴性血清100μL,鼠类阴性血清15μL)、抗血清(兔子20-40 mL、大鼠3-5mL;豚鼠3-5mL;小鼠 0.2mL)。
- 结题报告:包括免疫原序列、SDS-PAGE电泳图谱、表达克隆测序报告、效价检测ELISA结果,WB检测免疫原结果等。
解决方案
ABclonal标准多克隆抗体制备采用优化的制备流程,所需时间较短。深受广大科研用户的好评。多抗制备选用两只SPF(Specific Pathogen-Free)级日本大耳白,采用完全弗氏佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)皮下多点注射。ABclonal保证所有免疫动物都注射同一抗原。
| 流程 |
时间 |
描述 |
| 阴性血清采集 |
Day0 |
免疫前血清采集 (5mL/只) |
| 一免 |
Day 1 |
0.3mg免疫原(CFA), 皮下多点注射(10点) |
| 二免 |
Day 14 |
0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
| 三免 |
Day 35 |
0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
| 四免 |
Day 56 |
0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
| 抗血清采集 |
Day 63 |
100μL/只 |
| ELISA 检测 |
Day 64 |
根据ELISA检测结果,决定是正常牺牲兔子还是调整免疫周期 |
| 最终采血/加免 |
Day 70 |
牺牲兔子或加免,0.15mg免疫原(IFA), 皮下多点注射(4点) |
| 纯化/检测 |
2-3周 |
2mg以上抗原纯化抗体 |
*备注:客户提供抗原,项目周期大概10周左右,ABclonal制备重组蛋白抗原/多肽抗原,周期大概为14周/15周左右。
ABclonal免疫外包服务免疫2只兔子/3只大鼠/3只豚鼠/5只小鼠,服务内容仅限于动物免疫及抗血清采集,周期大概9周左右。客户如有额外需求,另行约定。
案例展示
水稻“增产减肥”,开启农业新一轮“绿色革命”
- ABclonal合作技术:
SLR1蛋白表达及抗体定制
- 题目:
Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture
-
- 客户单位:
中国科学院遗传与发育生物学院研究所
造血干祖细胞归巢世界难题谜底揭开
- ABclonal合作技术:
VCAM-1蛋白表达及抗体定制
- 题目:
VCAM-1+ macrophages guide the homing of HSPCs to a vascular niche
-
物种:
Zebrafish
应用:
IF
PMD:
30455424
- 客户单位:
中国科学院上海营养与健康研究院
中国学者关于DNA甲基转移酶的最新发现有望改写教科书
- ABclonal合作技术:
DNMT1蛋白表达及抗体定制
- 题目:
Stella safeguards the oocyte methylome by preventing de novo methylation mediated by DNMT1
-
- 客户单位:
中科院生物物理所