服务流程
售前沟通
接收订单及样品
基因合成/载体构建
蛋白表达/多肽合成
动物免疫
效价检测
筛选及放大
抗体纯化
抗体验证
产品交付
服务内容及说明
| 服务项目 |
服务内容 |
| 蛋白质修饰和定量 |
磷酸化 (-PO43: Ser,Thr Tyr) |
| 甲基化 (-CH3: Lys, Arg, His) |
| 乙酰化 (-CH3CO: Lys) |
| 糖基化(-glycosyl: N-linked Asp, Arg; O-linked Ser, Thr, Tyr) |
| 泛素化(-ubiquitin: Gly-Lys) |
| SUMO化 (Small Ubiquitin-like Modifier (SUMO), SUMO-1,2,3) |
| 蛋白质构象变化和蛋白质相互作用 |
活化和失活 |
| 由蛋白质相互作用形成的新型抗原表位 |
| 朊病毒 |
| 表观遗传学 |
甲基化(-CH3: DNA CpG; mRNA; ChIP) |
| 细胞分化 |
| 化学小分子 |
|
| 服务阶段 |
交付产品 |
| 多抗阶段 |
抗血清 |
| Protein A纯化多抗 |
| 抗原亲和纯化多抗（可选） |
| 上述样品检测数据 |
| 单抗阶段I |
B细胞上清50-80uL |
| B细胞上清筛选数据 |
| 单抗阶段II |
小量重组表达上清（1mL） |
| 纯化单抗（0.1mg以上，与抗体产品交付合并） |
| 抗原序列 |
含抗体序列的载体（1mg以上，按合同约定的克隆数与质量） |
| 抗体验证报告 |
| 其它合同中约定的材料（抗体序列、质粒等） |
客户提供
- 目的基因序列、20µL以上质粒模板（浓度100ng/µL，无模板可以基因合成）；
- 构建好的表达质粒或者已表达菌液（表达条件和蛋白SDS-PAGE电泳图）；
交付标准
- 抗血清：Protein A纯化多抗；抗原亲和纯化多抗（可选）；上述样品检测数据。
- 单抗阶段 Ⅰ :B细胞上清50-80uL；B细胞上清筛选数据。
- 单抗阶段 Ⅱ ：小量重组表达上清（1mL）；纯化单抗（0.1mg，与抗体产品交付合并）。
- 抗原序列：含抗体序列的载体（1mg以上，按合同约定的克隆数与质量）；抗体验证报告；其它合同中约定的材料（抗体序列、质粒等）。
重组兔单抗优势
· 亲和力高 · 特异性强 · 更多的表位选择 · 批次稳定
重组兔单克隆抗体开发流程 （项目周期：24-32周）
抗原设计和制备
抗血清收集
细胞分选和富集
B细胞培养与初筛
IgG 基因克隆与第二次筛选
案例展示
Rabbit Monoclonal Antibody For Post-translational Modification Site
Prescreening QC
- Sort with phosphorylated peptide
- 1536 Single B cell clones
- 117 Phosphorylated peptide positive/non-
- phosphorylated peptide negative clones
Randomly pick 11 clones for mini-WB
WB with final purified 4 clones
- mAb dilution: 1 ug/ml each clone
- -: negative lysate: non-phosphorylated target protein
- +: positive lysate, phosphorylated target protein
Rabbit Anti-pY240-PTEN Specific Antibody
Anti-Idiotype (Anti-ID) Rabbit Monoclonal Antibodies Development
Fab Antigen Preparation
Pilot Study
Validation of Immunized Serum
- 1920 Single B cell clones
- 382 Positive Clones (rate 20%)
- 160 blocking anti-ID clones (Type 1)
- 222 non-blocking anti-ID clones （Type 2)
- Type I: blocking
- Specific to paratype
- Blocking antibody-antigen binding
- Measure free therapeutic antibody in blood
- Type I: blocking
- Specific to paratype
- Blocking antibody-antigen binding
- Measure free therapeutic antibody in blood
- Type I: blocking
- Specific to paratype
- Blocking antibody-antigen binding
- Measure free therapeutic antibody in blood
Randomly Pick 5 clones (3 Type 1 & 2 Type 2)
Therapeutical Rabbit Monoclonal Antibodies Development
- 1152 Single B cell clones
- 431 positive clones (37%)
- Select 147 B cell sups for further Assay
- 56 FACS clones
-
26 Function clones (Antagonist)
In Vitro Reporter Assay
PMBC Stimulation Assay
