产品信息
产品描述
肽 N-糖苷酶 F(Peptide N-Glycosidase F,PNGase F)是一种糖基肽酶,理论分子量 35.9 kD,可以从糖蛋白中切割天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂寡糖。PNGase F 的切割位点为糖蛋白最内侧 N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。常应用于抗体、糖蛋白去糖基化。
产品特点
- 产品来源:来自Elizabethkingia miricola (Chryseobacterium miricola)的基因构建在大肠杆菌中表达并分离纯化得到,带有末端多聚His标签;
- 蛋白纯度:SDS-PAGE检测蛋白纯度大于95%,无蛋白酶污染。
产品应用
通过SDS-PAGE、WB等方法鉴定蛋白质是否存在N-糖基化;抗体、糖蛋白的体外去N-糖基化修饰;聚糖结构分析。
产品保存
-20℃保存
产品组分
组分名称 | 浓度 | 20,000 U | 100,000 U |
PNGase F, Recombinant (Expressed in E.coli ) | 500,000 U/mL | 40 μL | 200 μL |
10X Denaturing Buffer | 10X | 1 mL | 1 mL |
10X Sodium Phosphate | 10X | 1 mL | 1 mL |
10% NP-40 | 10% | 1 mL | 1 mL |
1. GOX去糖基化结果展示
在10 μL反应体系中,加入10 μg变性底物蛋白和相关的反应试剂,然后分别加入2 U、1 U、0.5 U的PNGase F,37℃反应1h,将所有反应产物制样,通过SDS-PAGE检测,底物蛋白条带均发生了明显的改变,PNGase F去除了N-糖基化修饰。
2. RNase B去N-糖基化结果展示
在10 μL反应体系中,加入10 μg变性RNase B底物蛋白和相应的反应试剂,然后分别加入1 U的RK20564和RK20565,37℃反应1 h,将所有反应产物制样后,通过SDS-PAGE检测。结果显示变性条件下,能基本除去10 μg RNase B的N-糖基化修饰。
FAQs
说明书
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