本产品的Polymer-HRP 山羊抗兔二抗采用了最新的多聚体偶联技术,将辣根过氧化物酶和山羊抗兔二抗偶联聚合成葡萄串式的结构。这不仅增加了山羊抗兔二抗的酶标密度,提高了其检测的灵敏度,而且降低了偶联后聚合物的空间位阻,增强了聚合物的组织渗透能力。同时,采用非生物素标记的检测系统,避免了内源性生物素引起的非特异性背景染色。
1. 按照常规免疫组化(IHC)或者多重荧光免疫组化(TSA)的实验流程步骤,组织切片经脱蜡、抗原修复、过氧化物酶封闭液封闭、血清或者BSA封闭、一抗孵育后,PBS洗三次,每次5min。
2. 孵育Polymer-HRP 山羊抗兔二抗:每张切片上滴加50-100 μL 即用型Polymer-HRP 山羊抗兔二抗,以完全覆盖组织,室温孵育30-60min,PBS洗三次,每次5min。
3. DAB或者TSA荧光染料显色:每张切片上滴加50-100 μL DAB或TSA工作液,室温孵育数分钟。显色完成后,弃去工作液,PBS洗三次,每次5min。
4. 细胞核复染:苏木素或者DAPI复染细胞核。
5. 封片:免疫组化切片按常规步骤经梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片;多重荧光免疫组化切片使用抗荧光淬灭封片剂封片。
1.Polymer-HRP 山羊抗兔二抗为即用型二抗,使用前不需要稀释。
2.每张切片的抗体使用量根据组织的大小,以均匀覆盖组织为宜。
3.Polymer-HRP 山羊抗兔二抗为4℃保存,避免冷冻结冰。
4. 抗体孵育的时间应根据预实验摸索适宜的实验条件。