标签系统介绍

融合标签技术始于20世纪末,做为一种基于报告基因的DNA技术,它的出现极大促进了基因组学和蛋白质组学的发展。随着生物技术的发展，科研人员可以通过DNA重组技术，构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白，进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化，以达到研究的需求。

Flag标签系统应用

Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统，广泛应用于Western Blot、免疫荧光、免疫沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的多肽片断。Flag标签只有8个氨基酸组成，因此它不会占据其他表位与结合域，避免导致融合蛋白的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点，Flag标签倾向于定位在融合蛋白表面，因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解去除, 肠激酶专一识别该肽序列C末端的5个氨基酸残基。

Flag标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于各种细胞类型，包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等，相应的Flag标签抗体也被广泛应用。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。

Flag标签系统优势

概括来说，Flag作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：

• 1. Flag作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
• 2. 融合Flag的目的蛋白，可以直接通过Flag进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白，并且纯化效率高。
• 3. 融合在N端的Flag，其可以被肠激酶切除（DDDDK），从而得到特异的目的蛋白。因此现Flag标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
• 4. Flag作为标签蛋白，可以被抗Flag的抗体识别，这样就可以通过Western Blot、ELISA、IF、IP等方法对含有Flag的融合蛋白进行检测、鉴定、定位和定量，尤其适用于那些找不到商业化抗体的特殊物种蛋白研究。

如何选择合适的Flag标签抗体？

我们在选择Flag抗体时，主要根据自己的需求，特别是实验应用上的需要。另外，一个抗体验证的应用类型越多，在使用过程中的选择空间就越大；由于Flag抗体消耗巨大，在特异性和稳定性方面需要重点考虑，以免影响实验可重复性和精确性。 此外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，相当于实际应用时的稀释比，高效价所对应的高稀释比也意味着高性价比。

为什么推荐ABclonal品牌Flag抗体？

融合标签，如Flag的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签除了Flag还包括myc、HA、His、GST、GFP等，每个都有其自身特点和应用。

精选标签抗体

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