产品信息 产品描述
Single Cell/Low Input cDNA Synthesis & Amplification Module能够以1~1000个单细胞或者10 pg~10 ng Total RNA为模板进行全长cDNA的合成与扩增。试剂盒采用优化后的Oligo (dT) VN primer 作为逆转录引物,并通过Reverse Transcriptase的末端转移酶活性活性对cDNA的3’端添加一段接头序列,后续通过PCR扩增获得双链全长cDNA产物。该试剂盒获得的cDNA无3’末端偏好性,且rRNA残留率较低。 试剂盒中每种试剂都经过了严格的质量控制,且每一批次的建库试剂盒都经过了建库和上机测序的验证,保证每一批次的试剂盒性能质量稳定。
产品特点
单个细胞灵敏度 扩增产物完整 基因检出能力强 数据重复性高 工作流程
产品保存
RK20310-1 Store at -20℃; RK20310-2 Store at -80℃
产品组分
模块 试剂管名称 24 RXN 96 RXN Box1 Control Total RNA(1μg/μL) 5 μL 5 μL Box1 TSO PrimerⅡ 48 μL 192 μL Box2 Cell Lysis Buffer 72 μL 288 μL Box2 Oligo (dT) RT Primer 24 μL 96 μL Box2 dNTP Mix 24 μL 96 μL Box2 5 X RT Buffer 96 μL 384 μL Box2 Reverse Transcriptase 24 μL 192 μL Box2 RNase Inhibitor 48 μL 192 μL Box2 PCR Primer 24 μL 96 μL Box2 2X PCR Master Mix 600 μL 2400 μL Box2 Nuclease-free Water 1 mL 2 mL Box2 Low-EDTA TE 1 mL 2 mL
1. cDNA产量及片段大小分析
分别使用RK20310(ABclonal)与竞品A试剂盒获得10pg Mouse Brain Total RNA、单个293T和HeLa细胞来源的全长cDNA,测试表明RK20310(ABclonal)试剂盒所获得的全长cDNA产量明显高于竞品,且cDNA扩增产物完整。
2. 基因检出数目分析
使用RK20310(ABclonal)与竞品A试剂盒获得不同样本来源的全长cDNA,分别构建illumina平台全长cDNA测序文库,数据分析表明RK20310(ABclonal)获得的cDNA基因检出数均高于竞品。
3. 基因结构及偏好性分析
使用RK20310(ABclonal)与竞品A试剂盒获得不同样本来源的全长cDNA,分别构建illumina平台全长cDNA测序文库,数据分析表明RK20310(ABclonal)获得的cDNA Genebody无3’端偏好,与竞品相当。
4. 数据重复性分析
使用RK20310(ABclonal)与竞品A试剂盒获得不同样本来源的全长cDNA,分别构建illumina平台全长cDNA测序文库,2次实验重复。结果相关性分析表明RK20310(ABclonal)来源的cDNA在不同样本类型中均具有较高的数据重复性(R>0.95)。
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