产品信息
产品描述
LbCas12a Nuclease来源于 Lachnospiraceae bacterium。Cas12a只需要单个由40-44nt核苷酸组成的crRNA引导,在靶标双链DNA存在PAM(TTTV)序列的情况下,特异性地剪切靶标序列。LbCas12a Nuclease的切割发生在PAM 3’端约17个碱基处,形成一个突出末端。本产品还具有一种 trans 切割的活力,当靶标 dsDNA、crRNA 和 Cas12a 蛋白形成三元复合体时,会产生较高的非特异性ssDNA切割活性。
产品应用
体外 sgRNA 效率验证
基因编辑
产品保存
-20℃保存
产品组分
组分名称 | 组分编号 | 规格-1 100 pmol | 规格-2 1000 pmol |
LbCas12a Nuclease* | RM20551 | 100 pmol | 1000 pmol |
10X Buffer CutB | RM20105 | 1 mL | 1 mL |
1. 顺式剪接效果
实验结果表明,LbCas12a在crRNA的引导下特异识别并剪切pUC19序列,导致靶标DNA双链断裂,将总长约2600bp的底物切割成1750bp、850bp的两个片段。
2. 反式剪接效果
使用荧光定量PCR仪收集荧光信号,每60s收集一次荧光信号。实验结果表明,当LbCas12a在crRNA引导下与特异靶标dsDNA形成三元复合物后,便会被激活针对ssDNA的高效反式剪切活性,将体系中的ssDNA报告探针切碎,从而发出荧光信号。
FAQs
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