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Cell lysis buffer for IP (without inhibitors) (RM00022)

货号: RM00022
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产品信息

产品简介
本产品为NP-40裂解液,是一种比较温和的细胞组织裂解液。裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP和 Co-IP 等实验。裂解液中不含蛋白酶抑制剂,需根据要求选择添加蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂。当用于研究磷酸化 作用使蛋白改良时,需加入磷酸酶抑制剂。如果出现目标蛋白降解,应加入蛋白酶抑制剂。用该裂解液裂解得到的样 品,可用BCA或Braford法测定浓度。
产品组成
氯化钠(NaCl)136.89 mM
磷酸氢二钠(Na2HPO4)1.01 mM
磷酸二氢钾(KH2PO4)1.76 mM
氯化钾(KCl)2.68 mM
SDS0.347 mM
NP-400.5%(V/V)

注意事项

  • 1. 去除贴壁细胞的培养液时,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。
  • 2. 如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适量减少裂解液的用量,尽量控制在冰上裂解。
  • 3. 如果细胞量较多,必需分装成50~100万细胞/离心管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液溶液与细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
  • 4. 如果组织样品本身比较细小,可以适当剪切后直接加入裂解液溶解,再通过强烈Vortex使样品裂解充分。再离心取上清,用于后续实验。
  • 5. 细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或4℃进行。
  • 6. 本产品可作为免疫沉淀和免疫共沉淀的Washingbuffer使用,每200 μg磁珠加入1mL本产品进行洗脱即可。

保存条件和运输

Store at -20℃,有效期12个月。

文献引用 (15)

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