CUT&Tag Assay Kit (pAG-Tn5) for illumina (RK20265)

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货号: RK20265

产品信息

产品描述

CUT&Tag Assay Kit (pAG-Tn5) for Illumina（RK20265）是一款针对Illumina测序平台，用于研究DNA-蛋白质互作的文库构建试剂盒。适用于哺乳动物细胞，组织或植物样品经特殊处理后也可用本试剂盒进行相关实验。
Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag)是一种新兴的研究DNA-蛋白质互作的方法，克服了传统ChIP-Seq 技术的很多缺点，省时，操作简便，数据信噪比高，需要的细胞起始量低。本试剂盒使用与Protein A/G融合的Tn5转座酶，该融合蛋白能与抗体结合，并在目的靶标附近切割DNA，从细胞中回收DNA后直接进行PCR扩增即可完成文库构建。试剂盒内组分均经过严格的质量控制，保证产品稳定性和可重复性。

产品特点

操作简便：全流程优化，磁珠提取安全高效;
样本投入量低：技术革新，细胞投入量低;
信噪比高：背景远低于ChIP-Seq;
实验重复性好：平行样本之间的重复性好;
验证抗体：ABclonal验证CUT&Tag级别单抗（特色);

工作流程

产品保存

Box A中的10% SDS室温保存，Box A中其他试剂放在-20ºC保存；Box B放在4ºC保存，不能放到-20ºC。

产品组分

模块	试剂管名称	4次	12次
Box A1	pAG-Tn5 Transposome	4 µL	12 µL
Box A1	1×CT Wash Buffer²	10 mL	10 mL×3
Box A1	1×Dig-300 Buffer²	5 mL	7.5 mL×2
Box A1	NE1 Buffer	1 mL×2	6 mL
Box A1	MgCl₂ (1 M)	8 µL	24 µL
Box A1	rHSA (100 mg/mL)	8 µL	24 µL
Box A1	5% Digitonin³	64 µL	192 µL
Box A1	Protease Inhibitor Cocktail (100X，EDTA-Free)	152 µL	456 µL
Box A1	Nuclease-free Water	1 mL	1 mL
Box A1	1X TE Buffer	1 mL	1 mL
Box A1	10% SDS	8 µL	24 µL
Box A1	500 mM EDTA	12 µL	36 µL
Box A1	20 mg/mL Proteinase K	8 µL	24 µL
Box A1	Gloria Nova 2X PCR Mix for NGS	100 µL	300 µL
Box B1	ConA Beads	40 µL	120 µL
Box B1	AFTMag NGS DNA Clean Beads	720 µL	1.08 mL×2
Box B1	1×ConA Bind Buffer	840 µL	840 µL×3

检测数据

折叠内容 >

1. 植物样本测试数据

使用CUT&Tag试剂盒RK20265对10⁴数量的拟南芥根细胞核进行H3K4me3 抗体(Active Motive, Cat: 39060和ABclonal, Cat: A2357）的CUT&Tag实验，结果显示不同厂家抗体获取的文库分布，reads集中分别在TSS区域，motif序列都比较一致。图片展示了2号染色体上一段代表性区域，结果显示不同细胞投入量染色体图谱基本一致，可提供与ChIP-Seq 结果一致的覆盖图谱。

2. 不同细胞系测试数据

使用CUT&Tag试剂盒RK20265对10⁵数量的A-431细胞、HeLa细胞、MCF-7细胞、U251MG细胞、Daudi细胞、Jurkat细胞及THP-1细胞进行H3K4me3 抗体(Active Motive, Cat: 39060) 的CUT&Tag实验。图片展示了7号染色体上一段代表性区域，结果显示不同癌细胞系染色体图谱基本一致，显示RK20265 适用于多种细胞系的DNA-蛋白质互作研究。

3. 不同抗体测试数据

使用CUT&Tag试剂盒对10⁵数量的K562细胞进行不同抗体的CUT&Tag实验（H3K4me3 (ABclonal, Cat: A2357)、H3K9me1 (ABclonal, Cat:A20734)、H3K27ac (ABclonal, Cat: A2771)、H3(ABclonal, Cat: A17562)、H3K36me3(ABclonal, Cat: A20379)、CTCF (ABclonal, Cat: A19588)、CDK9 (ABclonal, Cat: A11145)、c-Myc (ABclonal, Cat: A19032)、RNA PoI II (Thermo, Cat: 1862243）。图片展示了1号染色体上一段代表性区域，结果显示不同抗体peak分布情况，RK20265 可适用于多种靶蛋白的DNA-蛋白质互作研究。