产品信息
产品描述
Golden Gate 2X Assembly Mix (BsmBI)是一款基于IIS内切酶BsmBI进行开发的无缝克隆预混液,可以一次实现多至8个插入片段的特定顺序组装克隆。
通过PCR在DNA片段两端加上BsmBI识别位点(CGTCTC)和不同的切割位点序列,由于IIS型限制性内切酶识别非回文序列,切割位点在识别序列外部,切割后产生4碱基粘性末端指导定向组装,且识别序列在酶切过程中被除去,不会残留在连接产物中,从而酶切反应和连接反应可以同步进行,实现一步无缝连接。无缝组装后的产物是完全封闭的双链DNA,可直接用于下一步PCR或其它分子生物学操作。
产品特点
- 快速便捷:边切边连,操作简单,节约时间;
- 灵活高效:对于sg DNA片段、单片段和多片段,都能高效连接;
- 存储稳定:试剂反复冻融20次,或在37℃存放7天,性能无明显变化。
产品应用
无缝克隆、基因编辑、基因合成、基因工程
产品保存
-20℃
产品组分
组分名称 | 规格1 | 规格2 |
Golden Gate 2X Assembly Mix (BsmBI) | 100 μL | 500 μL |
1. Golden Gate 2X Assembly Mix (BsmBI)介导的克隆原理
2. Sg DNA酶切连接效率测试
- 将编码Sg RNA的DNA片段(20 bp)进行连接测试,挑取10个克隆进行菌P验证,最右侧为NTC。结果显示,阳性克隆率可以达到100%,与进口品牌性能一致。
3. 不同数目片段酶切连接效率测试
- 选择不同数目(2片段-各380bp、4片段-各380bp、8片段-各220bp)的插入片段,分别进行连接测试,各挑取10个克隆进行菌P验证,最右侧为NTC。结果显示,2-8个插入片段均可成功连接,阳性克隆率可以达到90%-100%。
FAQs
说明书
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